Способ увеличения пролиферативного потенциала трехмерных опухолевых клеточных культур
Способ увеличения пролиферативного потенциала трехмерных опухолевых клеточных культур
В работе были получены основные результаты, включающие:
- добавление цитохалазина B, последовательное центрифугирование и фильтрация способствуют выделению индуцированных цитохалазином В мембранных везикул из мезенхимных стромальных клеток (иМВ МСК), обладающих округлой формой без включения клеточных остатков (Рисунок 1).
- мультиплексный анализ показывает наличие в иМВ МСК цитокинов/хемокинов и факторов роста (Таблица 1).
- добавление иМВ МСК к опухолевым клеткам увеличивает количество образующихся сфероидов в суспензионной культуре, что, предположительно, доказывает, роль иМВ МСК в пролиферации опухолевых клеток (Рисунок 2).
Таким образом, разработан способ увеличения количества трехмерных опухолевых клеточных культур in vitro путем добавления индуцированных цитохалазином В мембранных везикул.
Таблица 1. Мультиплексный анализ показывает наличие в иМВ МСК цитокинов/хемокинов и факторов роста
|
Цитокин/хемокин, содержащийся в иМВ МСК |
Пг/мл |
|
BCA-1 |
0,69 |
|
CTACK |
2,41 |
|
CXCL-16 |
1,19 |
|
IFN-g |
2,33 |
|
IL-2 |
5,965 |
|
IL-4 |
3,175 |
|
MCP-1 |
19,96 |
|
MCP-2 |
0,555 |
|
MDC |
3,475 |
|
MIP-1a |
0,78 |
|
MIP-1b |
2,515 |
|
MIP-3a |
2,585 |
|
MIP-3b |
6,81 |
|
TARC |
16,26 |
|
TNFa |
1,43 |
Конкурентные преимущества перед аналогами
Недостатками аналогов является то, что все они включают в себя добавление определенных веществ к клеткам, что может сопровождаться нежелательными эффектами. Подбор концентрации и изучение влияния химических веществ на разные типы клеток должен производиться в индивидуальном порядке. Например, использование железа в высоких концентрациях для некоторых клеточных линий, предположительно, может отрицательно воздействовать на молекулярные процессы, происходящие в клетке.